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手術者在術中應將一次性醫用手術包放在指定的位置上，以便隨時取用，并可防止互相碰撞。對鋒利的器械尤應精心使用。例如不應以眼科剪刀剪粗大且堅韌的組織或紗布卷、棉卷等。
長期保存的一次性醫用手術包宜涂上一層凡土林。經常使用的器械，在洗凈血污后用液體石蠟擦拭，以防生銹。鋒利器械和鈍性器械應當分別保存。鋒利器械不能用高壓和煮沸消毒，僅在十分急迫的情況下，可作短時間(3分鐘)的煮沸消毒．以免損害鋒利的刃口。
手術室人員在消毒一次性醫用手術包之前，應仔細檢查手術器械是否夠用、合適。例如剪刀的剪尖能否閉嚴，并將其兩股張開再放于消毒盤中消毒。線狀刀、槍狀刀可用擴大鏡或試鼓檢查刀刃是否鋒利，并用棉花將其尖端包好再行消毒。對各種環鉆特別要注意拭凈鉆筒內的油質，擦過后，方可消毒。對每個環鉆要記錄其使用的次數，便于手術時挑選。還應檢查虹膜鑷子的兩股彈性如何。
一次性醫用手術包的消毒多采用含宥0.5％亞硝酸鈉的1／1000新潔爾滅溶掖浸泡消毒。浸泡30分鐘可達消毒的目的，加入亞硝酸鈉是為了防銹。經常浸泡器械的消毒盤應每隔2~4周高壓消毒一次，并更換新的消毒液。
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